Come fare Buffer Con un misuratore pH

procedure di Chimica e Biochimica spesso dipendono da reazioni eseguite in un pH specifico . Tali reazioni possono beneficiare dell'utilizzo di una soluzione tampone , che è un composto quantificata dalla sua resistenza alle variazioni di pH quando gli acidi o basi forti sono aggiunti ad esso . L'esecuzione di queste procedure richiede una comprensione di miscelazione soluzioni tampone , così come la calibrazione e utilizzando meters.Things pH che vi serve
sali Soluzione tampone
1 litro bicchiere
1 litro di acqua distillata
piastra di agitazione
Mescolando bar
pH-metro
soluzioni di taratura del pH-metro
100 becher da ml
Micropipetter
punta Micropipetta
acido cloridrico ( HCl)
idrossido di sodio ( NaOH )

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Seleziona sali soluzione tampone con il confine pH corretto per la reazione . Proteine ​​individuali e reazioni hanno requisiti specifici di pH . I requisiti sono espressamente menzionati nel protocollo di reazione , presentato nella documentazione che accompagna la proteina /campione o registrate in tali volumi di riferimento come il Manuale di Chimica e Fisica . PH di una soluzione ottimale tampone deve scendere il più vicino possibile alla unità di pH della reazione e non dovrebbe mai superare pH più o meno 1 . Sali soluzione tampone sono disponibili come pacchetto o possono essere miscelati dai componenti di base seguendo ricette ampiamente disponibili .
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Versare la soluzione tampone in un bicchiere da 1 litro . Aggiungere 1 litro di acqua distillata . Mettere una barra di agitazione nel bicchiere e posizionare il bicchiere su un piatto di agitazione . Attivare la piastra di agitazione a basso livello medio . Mescolare fino a quando non cristalli soluzione tampone rimangono visibili .
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Porre 100 ml bicchiere in fase di test l'ago il pH della metro . Pulire l'ago spruzzando con acqua distillata . Il bicchiere prenderà il run off . Tarare il pH-metro utilizzando le soluzioni di calibrazione . Pulire nuovamente l'ago . Smaltire il contenuto deflusso catturati nel bicchiere da 100 ml .
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Portare il pH-metro alla piastra di agitazione e bicchiere da 1 litro . Introdurre l'ago di test nella soluzione tampone . Premere il pulsante di calcolo del pH del misuratore per determinare il pH della soluzione . Se questo valore è troppo alto o basso , la soluzione richiede i seguenti passaggi aggiuntivi .
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Mettere una punta micropipetta fresca sul micropipetter . Attivare la piastra di agitazione a bassa velocità . Se il pH è troppo alto , utilizzare il micropipetter aggiungere una goccia alla volta di acido cloridrico alla soluzione . Il lamierino agitazione per miscelare la soluzione e misurare il pH . Ripetere il processo fino a quando il pH della soluzione è il valore necessario. Se il pH è troppo basso , ripetere questo passaggio con idrossido di sodio al posto di acido cloridrico .