Se le due subunità di un dimero sono legati in modo covalente , non hanno alcun effetto sul modo in cui si sperimentalmente determinare la massa molecolare perché sono diventati una singola molecola . Vuoi trovare la massa di una mole di molecole del composto , e poiché il dimero è un composto , non ci sono considerazioni qui che non si applicherebbero normalmente . I biochimici , tuttavia, spesso si occupano di proteine che formano dimeri che sono debolmente uniti tra loro da legami non covalenti , e questi sono un po 'più interessante .
Dissociazione
si calcola la massa molare di un dimero di proteine , il risultato potrebbe dipendere dal fatto che si stava guardando la massa del dimero o delle sue subunità . Un omodimero costituito da due subunità identiche , per esempio , avrebbe il doppio di quello di una subunità una massa molare . Un eterodimero fatto da subunità non identici , al contrario , è un po 'diverso , perché ognuno dei due subunità ha generalmente una massa molare diverso .
Riscaldamento
dimeri della proteina riscaldamento di solito li induce a dissociarsi . In genere , sarà anche denaturare le proteine e causare loro di perdere la loro forma . Se le due subunità sono collegati tra loro da una sorta di legame covalente chiamato un ponte disolfuro , trattandoli con mercaptoetanolo rompe il legame disolfuro per liberare le subunità . I biochimici di solito proteine di calore e aggiungere mercaptoetanolo prima di effettuare una procedura chiamata una macchia occidentale , così questi due passaggi consentono di garantire le proteine sono completamente denaturato .
Mass Spectrometry
spettrometria di massa è un modo molto preciso per determinare la massa molare di proteine e di altre molecole . Vaporizzando proteine nello stesso modo che altri composti vengono vaporizzati per spettrometria di massa potrebbe li frammentare , tuttavia, in modo spettrometria di massa per le proteine si basa tipicamente su entrambi il tecniche ( MALDI ) anziché elettrospray o il desorbimento laser assistita dalla matrice . Queste tecniche possono causare dimeri a dissociarsi , anche se a volte dimeri possono formarsi anche durante il processo , e gli scienziati devono prendere queste possibilità in considerazione quando si interpretano i loro dati .