Come risolvere un Primer Dimer

La reazione a catena della polimerasi , o PCR , è una tecnica di biologia molecolare utilizzata per amplificare regioni specifiche di DNA . PCR dipende primer , che sono brevi filamenti di DNA complementari e specifici del DNA di interesse . Mentre primer generalmente si legano al DNA Matching loro sequenza , che di tanto in tanto si legano e amplificare l'un l'altro , causando il fenomeno noto come dimer.Things di primer che ti serviranno
sequenze primer

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Esaminare il contenuto di GC (numero di G e C di ) nella sequenza primer. GC legame è più forte di AT incollaggio a causa del legame idrogeno aggiuntivo tra la guanina e citosina . Incollaggio ottimale è di almeno il 50 per cento contenuto di GC .
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Esaminare la temperatura di ricottura della tua reazione . Temperature di ricottura basse , generalmente definiti come 55 C o inferiori , possono causare un legame non specifico del primer , che può causare dimeri di primer , oltre all'amplificazione di sezioni genomiche errati .
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Doppia -controllare la quantità e la concentrazione dei primer aggiunto al PCR . Un eccesso di primer , in genere più di 75 picomoli , può causare dimeri di primer , pure.