Come eseguire perossidasi Stains

Individuazione di anticorpi è importante sia per la ricerca di laboratorio e diagnostica clinica . Normalmente , gli anticorpi sono invisibili . Se si vuole rilevare gli anticorpi in un pezzo di tessuto , è necessario utilizzare una strategia diversa da solo guardando attraverso un microscopio . Alcalina colorazione fosfatasi e perossidasi colorazione sono due metodi . In colorazione con perossidasi , un enzima chiamato perossidasi , che si trova a anticorpi , viene utilizzato per catalizzare una reazione chimica , con un conseguente membrane.Things colorate ti serviranno
naftolo derivato ( 10 mL )
benzidina - derivato soluzione ( 1 bottiglia )
H3PO4 - citrico soluzione tampone ( 200 mL )
perossido di idrogeno ( 1 bottiglia )
cilindro di misura
Micropipetta
PBS o tris tamponata
salina vassoio di plastica

Mostra 1

Mescolare 10 ml di naftolo derivato e la bottiglia di soluzione di benzidina - derivato per fare una scorta soluzione colorante Altre istruzioni
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Mescolare insieme il 200 mL di soluzione tampone H3PO4 - citrico e la bottiglia di acqua ossigenata .
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Mettere 50 mL della soluzione tampone in un 50-100 ml cilindro graduato .
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Aggiungere 2.5 mL della soluzione stock di colorazione utilizzando la micropipetta e mescolare .
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Inserire questa soluzione colorante in una vaschetta di plastica .
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Lavare la membrana con soluzione salina ( PBS o tris - buffered saline) e immergerlo nella soluzione colorante . Lasciare a bagno per tra i 10 minuti e 1 ora.
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Quando la band diventa visibile , rimuovere la membrana e sciacquarlo sotto l'acqua corrente per 10 minuti per fermare la reazione .