Accendere lo spettrometro e azzerare che mettendo acqua distillata in una cuvetta e funzionante come un campione . Diversi spettrometri avranno software o sistemi di manovra, leggermente diverso , ma ognuno dovrebbe venire con chiare istruzioni su come calibrare con un campione in bianco di acqua distillata .
2
Riempire una cuvetta con il primo campione di nota concentrazione . Eseguire l'esempio per determinare il valore di assorbanza . Annotare il numero del campione , il già noto concentrazione e la lettura di assorbanza . Ad esempio , Campione 1 potrebbe avere una concentrazione di 0,05 moli per litro e una assorbanza di 400
3
Riempire una cuvetta fresco con il campione successivo ed eseguirlo attraverso lo spettrometro . Registrare il numero del campione , la concentrazione , e assorbanza . Ad esempio, Esempio 2 può avere una concentrazione di 0,5 moli per litro e una assorbanza di 4,000 . Fare lo stesso per il terzo campione . Per questo esempio , si supponga che Esempio 3 ha una concentrazione di 5 moli per litro e una assorbanza di 40.000 .
4
Utilizzare il Beer -Lambert legge per calcolare il coefficiente di assorbimento molare per ogni campione . Questa equazione indica che assorbanza è uguale alla concentrazione della soluzione moltiplicato per la lunghezza del percorso ( la larghezza della cuvetta ) moltiplicato per il coefficiente di assorbimento molare : A = ebc , dove e è il coefficiente di assorbimento molare , b è la lunghezza del percorso , c è la concentrazione e A è l'assorbanza . Moltiplicare la lunghezza del percorso in centimetri dalla concentrazione , poi dividere l' assorbanza da quel numero . Per questo esempio , si supponga che la cuvetta è larga 1 centimetro . Per il campione 1 , moltiplicare 1 da 0,05 , che è uguale a 0,05 . Dividere 400 da 0.05 per un coefficiente di assorbimento molare del 8000 .
5
Eseguire lo stesso calcolo per gli altri campioni . Per Campione 2 , moltiplicare 1 da 0.5 per un risultato di 0,5 . Dividere 4.000 da 0,5 a produrre un costante assorbimento molare di 8.000 . Lo stesso calcolo per il campione 3 produce anche un risultato di 8.000 . In condizioni di laboratorio reali , ciascun campione produrrà una costante leggermente diverso . Registrare ogni uno .
6
media tutte le costanti di assorbimento molare calcolato sommando insieme e dividendo il totale per il numero di campioni noti voi RAN . È ora possibile utilizzare la risultante coefficiente di assorbimento molare per stimare la concentrazione di campioni sconosciuti .