Come determinare la concentrazione di paracetamolo in un campione

Il paracetamolo , o acetaminofene , è un antidolorifico comune over - the-counter si trovano in farmaci come il Tylenol . È possibile determinare la concentrazione di paracetamolo in un campione con una varietà di metodi . Il più conveniente per voi dipende dal tipo di campione e il livello di sensibilità e precisione avete bisogno . Uno dei tanti possibili approcci comporta spettrofotometria - brillante luce di una particolare lunghezza d'onda attraverso il vostro campione e utilizzando l'assorbanza per capire quanto acetaminofene era presente . Il metodo qui descritto è stato riportato nel " Journal of Food and Drug Analysis" in 2008.Things Hai bisogno
guanti, occhiali e camice da laboratorio ( mettere questi sulla prima di iniziare )
micropipetta calibrato con puntali in plastica monouso
4 per cento di rame ( II ) solfato in acqua ( reagente C )
provette e provette
4 per cento di acido bicinconinico ( BCA ) in acqua ( reagente B )
Parafilm
acetato di etile
cappa aspirante
cloruro di sodio
Spatola
Pasteur pipette con bulbo di gomma
soluzione standard di paracetamolo con concentrazione nota
Cuvette
Spettrofotometro
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1

Misurare 200 microlitri di reagente C con la micropipetta e aggiungerlo a una provetta pulita . Misurare 5 ml di reagente B , li aggiungere alla provetta e agitare delicatamente per mescolare .
2

Coprire la provetta con Parafilm e conservarla per un uso successivo .

3

Pipettare 0,5 mL di vostra sconosciuto in un'altra provetta .
4

Trasferisci i tuoi provette per la cappa .
5

Aggiungi un millilitro di acetato di etile al sconosciuta , seguito da alcuni cristalli di cloruro di sodio . Tappare la provetta e agitare vigorosamente per 30 secondi per mescolare il contenuto , avendo cura di tenere il pollice sul tappo in ogni momento mentre lo fate . Subito dopo , togliere il tappo per rilasciare qualsiasi pressione , quindi richiudere il tubo .
6

Lasciare che il contenuto della provetta per separare in due strati . L' acetato di etile è meno denso e quindi formerà lo strato superiore o " fase organica . " Aggiungere 2 ml della soluzione avete preparato al punto 1 per un altro provetta pulita .
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Utilizzo di uno dei tuoi pipette Pasteur , trasferire accuratamente lo strato inferiore in una provetta pulita , quindi trasferire lo strato organico alla provetta contenente 2 ml di reagente misto. Prendete questo tubo e agitare delicatamente o cappuccio e vortice a mescolare . Lasciare riposare a temperatura ambiente per cinque minuti .
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Fate una cuvetta pulita e aggiungere 1 ml di acqua deionizzata . Mettere nel spettrofotometro e usarlo come un vuoto per correggere la lettura spettrofotometro . Le istruzioni precise da seguire per utilizzare il vostro spettrofotometro dipende dal produttore . Vedere le loro linee guida per i dettagli .
9

Pulire la cuvetta e asciugare bene ( o utilizzare un'altra cuvetta pulita) e aggiungere un po ' del vostro reagente misto ad una cuvetta pulita fino a raggiungere la piena mark 1 mL . Posizionare la cuvetta nello spettrofotometro e misurare la sua assorbanza .
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Aggiungere 1 ml di soluzione standard di una cuvetta pulita (sia pulita e asciugare il vecchio o utilizzare uno nuovo ) , poi testarlo nella cuvetta e registrare la sua assorbanza .
11 <​​p> Aggiungere 1 ml di vostro sconosciuto a una cuvetta pulita , posizionarlo nello spettrofotometro e misurare la sua assorbanza .
12

Sottrai l'assorbanza della miscela reagente vuoto dal assorbanza dello sconosciuto . Fare lo stesso per lo standard .
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Dividere il risultato per l'ignoto dal risultato per lo standard , poi moltiplicare per la concentrazione di paracetamolo nella norma . Questo vi darà la vostra concentrazione paracetamolo .